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细胞简介：

巨噬细胞源自单核细胞，属于细胞，有多种功能，属不繁殖细胞群，难以长期培养。

巨噬细胞在吞噬和异物和衰老死亡细胞、分泌生物活性物质，调节血细胞生成与参与应答等方面发挥着广泛的生物学作用，是一类在体内发挥重要效应的细胞，为体内的稳态维持和组织防御提供保障。

细胞特性
：

1）  组织来源于实验动物的正常骨髓组织
。

2)  细胞鉴定：CD68或MAC387荧光染色为阳性

。

3)  经鉴定细胞纯度高于90%

。

4)  不含有 HIV-1
、 HBV、HCV
、支原体
、、酵母和。

5)  细胞生长方式：圆形，不规则细胞

，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 Delf 原代巨噬 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基
。

实验报告：

一
、分离与培养

：

1、无菌条件下

，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次

，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min


，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养

；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2

、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品
：

核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒50T

聚磷酸肌醇磷酸酶4A抗体

INPP4A

锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体

ANKS1A

血液葡萄糖激酶（glucose kinase）比色法定量检测试剂盒

人干扰素a-抗体(Anti-IFN-ab)elisa分析检测试剂盒

大鼠胱抑素D(CST5)elisa检测试剂盒

鱼组胺(HIS)elisa分析检测试剂盒

棕榈酰化膜蛋白7抗体

MPP7

20号染色体开放阅读框118抗体

C20orf118

MAPK调控蛋白TRB2抗体  Anti-TRIB2

RNA结合基因蛋白3抗体  Anti-RBM3

神经激肽B受体抗体  Anti-NKR/Neurokin B receptor

血管非炎性蛋白2抗体  Anti-VNN2

内质网蛋白44抗体

TXNDC4

C型凝集素结构域家族6成员A抗体

DECTIN2

S-腺苷蛋脱羧酶抗体  Anti-SAMDC/AMD1

NDUFAF4抗体  Anti-NDUFAF4

磷酸化帕金蛋白抗体  Anti-phospho-PARK2(Ser378)

微管蛋白β辅助因子D抗体  Anti-TBCD/Beta tubulin cofactor D

大鼠肝脂酶(HL)elisa分析检测试剂盒

基质重塑相关蛋白7抗体 MXRA7

大鼠白介素2受体(IL-2R)elisa检测试剂盒

小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)elisa检测试剂盒

小鼠骨髓巨噬细胞牛乳过氧化物酶(LPO)elisa分析检测试剂盒

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态

、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用

。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。