242net必赢

细胞简介
：

甲状腺是人体大的腺。棕红色
，分左右两叶，中间相连，呈 H形。甲状腺滤泡是甲状腺的基本结构单位。此外，甲状腺中以及外围还有部分结缔组织，这些结缔组织是由成纤维细胞组成，对滤泡起到保护作用
。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常甲状腺组织。

2)细胞鉴定
：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、
、酵母和。

5)细胞生长方式
：长梭形细胞

，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 DELF原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养基
。

实验报告：

一、分离与培养

：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液

，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置


，重复此步骤2-3次

，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3

、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗

， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)elisa检测试剂盒免费代测

犬CC趋化因子受体2(CCR2)elisa分析检测试剂盒

植物丙二醛（MDA）比色法定量检测试剂盒

小鼠骨胶原交联(Cr)elisa分析检测试剂盒

大鼠白介素2（IL－2）elisa检测试剂盒

植物磷脂酶D（Phospholipase D）总活性比色法定量检测试剂盒

人高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa分析检测试剂盒

大鼠果糖二磷酸醛缩酶A(ALDOA)elisa检测试剂盒

亚硝酸还原酶（NiR）测试盒

衰老相关Sigma受体蛋白抗体 OPRS1

丝/苏蛋白激酶SRPK2抗体 SRPK2

PE-Cy5标记小鼠CD44单克隆抗体 mouse CD44/PE-Cy5

PE标记人CD269 (BCMA)单克隆抗体 human CD269 (BCMA)/PE

组蛋白去乙酰化酶6重组兔单克隆抗体 HDAC6

17β羟类固醇脱氢酶7抗体 HSD17B7

红细胞蛋白Ank1抗体 Ankyrin-1

环指蛋白70抗体 RNF70

锌指蛋白93抗体 ZNF93

雄受体单克隆抗体

促甲状腺素β亚单位抗体 TSHB

蛋白BOC抗体 Protein BOC

ENOX1蛋白抗体 ENOX1

FAM19A3蛋白抗体 FAM19A3

磷酸化糖原合酶激酶3β抗体 phospho-GSK-3 Beta (Ser21)

磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 phospho-TRIM28 (Ser473)

NADP磷酸酶（NADPase）测试盒

病毒受体相关蛋白4抗体 Nectin 4

大鼠白血病抑制因子(LIF)elisa检测试剂盒

小鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa检测试剂盒

小鼠甲状腺成纤维细胞植物类黄酮测试盒

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。