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ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高
，说明有非特异性反应
，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等
。其形式可以是凹孔平板、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
。不管何种载体，在使用前均可进行筛选

：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度

，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制

，尤其是H2O2在临用前加入
。

产品名称：骨粘连蛋白（ON检测）ELISA检测试剂盒
英文名称：osteonectin,ON ELISA Kit
产品货号：EY-E97139
产品规格
：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液
，血清，血浆，细胞培养上清液
，尿液

，组织匀浆,心房水标本等等。 
​
样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟

，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液

。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干

，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

漆黄素 CAS 528-48-3 规格
：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

β-胡萝卜素;纯品型;标准品;有证书 CAS 7235-40-7 规格
：0.25g 订购|咨询

内酯甲 CAS 84104-71-2 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

细叶远志皂苷 CAS  规格：20mg 订购|咨询

CAS  规格：26000单位/支 订购|咨询

康普瑞汀磷酸二钠 CAS 168555-66-6 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

甜菜碱 CAS 107-43-7 规格：HPLC≥98%

，20mg/vial 订购|咨询

骨化二醇;Calcifediol CAS 63283-36-3 规格

：20mg 订购|咨询

三聚氰胺 CAS 108-78-1 规格
：200mg 订购|咨询

蒲公英甾醇酯 CAS  规格：HPLC≥98%,10mg/支; 订购|咨询

人参炔醇 CAS 21852-80-2 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

骨粘连蛋白（ON检测）ELISA检测试剂盒磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 英文名称：Phospho-Torc1 (Ser151) 0.1ml

CREB转录共激活因子TORC2抗体 英文名称：TORC2 0.1ml

坏死因子β抗体（TNFβ） 英文名称：TNF beta 0.1ml

转录因子7类似物2抗体 英文名称：TCF7L2 0.1ml

血栓素B2(一种新发现的抑癌基因)抗体 英文名称：TBX2 0.2ml

tRNA剪接内切酶2抗体 英文名称
：TSEN2 0.2ml

睾特异/激酶6抗体 英文名称
：TSSK6 0.2ml

蛋白D53抗体 英文名称
：D53 0.2ml

坏死因子受体相关因子7抗体 英文名称
：TRAF7 0.1ml

酪蛋白硫酸转移酶2抗体 英文名称

：TPST2 0.2ml

坏死因子受体超家族成员27抗体 英文名称
：EDA2R 0.2ml