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产品名称：NT-IGFBP-4ELISA检测试剂盒
英文名称：NT-IGFBP-4
产品货号
：EY-E98287
产品规格
：48T/96T
产品保存：2-8℃
，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆
，细胞培养上清液，尿液

，组织匀浆,心房水标本等等
。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒
。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存

，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存


，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中
，密封保存，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用

。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

5%葡萄糖肉汤培养基/5% Dextrose Broth Medium药品细菌培养
，滴眼剂金黄色葡萄球菌培养等250克国产/进口

大鼠肠静脉内皮细胞*培养基100mL

A9(小鼠下结缔组织细胞)5×106cells/瓶×2

亮白曲霉 Aspergillus candidus小鼠成骨细胞*培养基

PANC-1, 胰腺细胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

糖胆盐发酵管培养基/Lactose Bile Broth用于大肠菌群
、粪大肠菌群
、大肠杆菌的测定250克国产/进口

沙氏BHI琼脂/沙氏脑心浸液琼脂/Sabouraud BHI Agar真菌检测250克国产/进口

Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示踪上样缓冲液(还原,5x)5ml5ml

CCL-149(大鼠肺泡上皮细胞)小鼠骨髓间充质干细胞（EGFP标记）

SOC肉汤/SOC BrothBR250克国产/进口

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeU-937(组织细胞淋巴瘤细胞)

NT-IGFBP-4ELISA检测试剂盒NA培养基(含葡萄糖) 250g 用于菌落总数测定

SDAY培养基 250g 用于真菌的分离培养

液 2ml*20 每支添加于100mlHB4086中

Bolton肉汤添加剂 1ml*5支 每支添加于100ml

多粘菌素B（1万单位） 1万单位*5支 添加于100mlHB0249或HB0280或HB0248-1或HB0248中

SSDC培养基（ISO） 250g 用于小肠结肠耶尔森氏菌的分离培养

肉汤基础 250g 用于蜡样芽孢杆菌的试验

营养肉汤（日本标准） 250g 用于一般细菌培养、转种
、复壮、增菌等

BTB培养基 250g 用于弧菌选择性增菌培养

PAC斜面培养基 250g 用于弧菌的保存

乳酸杆菌肉汤培养基 250g 用于乳酸杆菌增菌培养

1%葡萄糖肉汤培养基 250g 用于初次分离细菌的增菌培养

SOC培养基 250g 用于基因工程菌大肠杆菌培养

茜素-β-半乳糖苷肉汤（Aliz-gal肉汤） 100g 用于食品中大肠菌群快速检测

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高

，说明有非特异性反应
，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全
、有明显地显色反应，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体
。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应
。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 
。