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        基质金属蛋白酶19ELISA检测试剂盒

        产品名称:基质金属蛋白酶19ELISA检测试剂盒

        产品特点:基质金属蛋白酶19ELISA检测试剂盒相关名称 :双料乳糖胆盐发酵培养基管(含小倒管) Double Lactose Bile Ferment Broth 10ml*20支
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        产品型号 :48T/96T

        更新日期:2021-04-29

        访问次数:583

        48T/96T基质金属蛋白酶19ELISA检测试剂盒的详细资料:

        产品名称 :基质金属蛋白酶19ELISA检测试剂盒
        英文名称:Matrix Metalloproteinase 19
        产品货号:EY-E99134
        产品规格 :48T/96T
        产品保存 :2-8℃,有效期6个月
        主要组成成分 :试剂 
            性状 :液体 
            产品规格:96T/48T 
            96T指可以做94个标本 ,2个标准对照 
            48T指可以做47个标本,1个标准对照 
            96T-84个样本 
            48T-42个样本 
            待检样本 :体液,血清,血浆 ,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。 

        样品收集 、处理及保存方法
        1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
        2)血浆-----EDTA 、柠檬酸盐 、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
        3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物 。
        4)组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎 。1000×g离心10分钟,取上清液
        5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存 ,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒 ,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
        注意事项
        1)试剂应按标签说明书储存 ,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存 。
        2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中 ,密封保存 ,以免变质。
        3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用 。保质前使用 。
        4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
        5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
        6)洗涤酶标板时应充分拍干 ,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
        7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子 。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒 。实验完成后应立即读取OD值 。
        8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
        9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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        ELISA 试验时,注意事项如下: 
             1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件 ,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清 、兔血清或BSA等封闭 。 
             2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括: 
             (1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等 。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等 。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体 ,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被 ,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性 ,据此判明其吸附性能是否良好 。 
             (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度 ,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定 :即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后 ,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。 
             (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
             (4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉 、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护 。有条件者应使用不致癌 、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应 。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜 。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入 。

         

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