属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例 ，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触 。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点 。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等 。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度 。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1～2小时 ，产物的生成可达。为加速反应 ，可提高反应的温度 ，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。
1)ELISA试剂盒实验洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净 。
2)用于检测的样品应保持新鲜 。
3)用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟 ，以便试剂集中到管底。
4)每次实验留一孔作为空白调零孔 ，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
5)要确保微量加样器的准确性 ，可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水可以看作是lg 、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定。
6)在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
7)吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡 ，吸取的量不够准确。
8).将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触 ，可使枪头上的液滴和孑L壁接触 ，液滴会自然流下去。吸入液体时的的方法是吸两档打一档 ，防止由于枪头的毛细作用使得部分液体不能流出而造成的误差。
9)吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差 。
10)实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量 。
55557-30-7 Levopropoxyphene Napsylate 萘磺酸左丙氧芬标准品 300mg
83915-83-7 Lisinopril 赖诺普利标准品 300mg
554-13-2 Lithium Carbonate 标准品 300mg
110-16-7 Maleic Acid 马来酸标准品 300mg
591-27-5 m-Aminophenol 间氨基标准品 300mg
3458-28-4 Mannose 甘露糖标准品 300mg
73816-42-9 Meclocycline Sulfosalicylate 磺基水杨酸氯甲烯标准品 300mg
119478-56-7 Meropenem 标准品 300mg
110-42-9 Methyl Caprate 癸酸甲酯标准品 300mg
106-70-7 Methyl Caproate 己酸甲酯标准品 300mg
111-11-5 Methyl Caprylate 辛酸甲酯标准品 300mg
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