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温育是ELISA测定中影响测定成败zui为枢纽的一个因素
。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等
。试剂的加入在ELISA试剂盒国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加，除了要留意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很轻易泛起重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区泛起非特异吸附
，从而引起非特异显色

。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值泛起

：生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式开释
，因此，在测定此类激素时，有必要在紧密亲密相连的时间距离内采取数份血样本
，以其中间值为测定值。ELISA试剂盒因此在ELISA测定中试剂的预备zui为枢纽的是，在实验开始前
，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡
。ELISA试剂盒加血清样本及反应试剂在现在的ELISA试剂盒中，血清样本的加入几乎是*的要使用微量加样器加入样本的步骤。