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        琥珀酸脱氢酶(SDH)操作步骤
        点击次数:1645 更新时间:2021-08-26

        操作步骤:

        1. 标准品的稀释与加样 :在酶标包被板上设标准品孔10孔 ,在di一 、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔 ,再在第三 、第四孔分别加标准品稀释液50μl ,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五 、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中 ,再在第七 、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L ,120 ng/L  ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

        2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁 ,轻轻晃动混匀。

        3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟 。

        4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

        5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体 ,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去 ,如此重复5次 ,拍干。

        6. 加酶 :每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外 。

        7. 温育:操作同3 。

        8. 洗涤 :操作同5 。

        9. 显色 :每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl ,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

        10. 终止 :每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)  。

        11. 测定:以空白空调零 ,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

        嗜酸性粒细胞过氧化物酶抗体

        核酸内切酶G抗体

        蛋白激酶受体A10抗体

        胞吐囊复合体蛋白2抗体

        磷酸化4E结合蛋白1抗体

        磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

        泛素交联酶抗体

        EB病毒核抗原抗体-3B抗体

        磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体

        乙酰基转移酶EID1抗体

        微管相关蛋白EB家族3抗体

        真核翻译起始因子5抗体

        遗传性前列腺癌蛋白2抗体

        磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

        磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

        磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

        染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体

        上皮细胞微管相关蛋白7抗体

        碱性鞘磷脂酶7抗体

        表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体

        长链脂肪酸延长酶长ELOVL6抗体

        蛋白激酶受体A6抗体

        蛋白激酶受体A3抗体

        蛋白激酶受体A7抗体

        蛋白激酶受体B1抗体

        磷酸化蛋白激酶受体B1抗体


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