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        RBP-4 elisa酶联免疫试剂盒的间接法
        点击次数:885 更新时间:2021-05-08

        的间接法:
        1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml ,每孔加0.1ml,4℃过夜。
         
        2.次日洗涤3次。
         
        3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤 。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
         
        4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
         
        5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
         
        6. 结果判定 :可于白色背景上 ,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅 ,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处 ,以空白对照孔调零后测各孔O·D值 ,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

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