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小鼠甲基化DNA（MDNA ）酶联免疫操作步骤
点击次数 ：1105 更新时间 ：2020-01-08
操作步骤
1.标准品的稀释 ：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释 。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂 ，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍） 。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀 。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液 ：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜 ，弃去液体，甩干 ，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干 。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外 。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5 。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止 ：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定 ：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值） 。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。