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        NF-KB ELISA定量试剂盒使用前该做些什么准备?
        点击次数:1101 更新时间:2019-12-21
           NF-KB ELISA定量试剂盒使用前该做些什么准备 ?
          NF-KB ELISA定量试剂盒在收集样本前都必须有一个完整的计划 ,必须清楚要检测的成份是否足够稳定 。对收集后当天就进行 检测的样本 ,及时储存在4℃备用 。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的 ,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融 。
          液体类标本:  包括血清、血浆 、尿液、胸腹水 、脑脊液 、细胞培养上清等。
          ①、血清:室温血液自然凝固10-20分钟后 ,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成 ,应再次离心。
          ②、血浆 :应根据标本的要求选择EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂 ,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
          ③、尿液 :用无菌管收集。NF-KB ELISA定量试剂盒离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心 。胸腹水、脑脊液参照此实行 。
          ④、细胞培养上清 : 检测分泌性的成份时 ,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
          ⑤、培养细胞:检测细胞内的成份时 ,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右 。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成 ,应再次离心。
          ⑥、组织标本 :NF-KB ELISA定量试剂盒切割标本后 ,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备用 。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化 。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。分装后一份待检测  ,其余冷冻备用 。
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