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        小鼠白介素1β酶联免疫分析试剂盒检测原理
        点击次数:981 更新时间 :2017-03-21

        本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体 ,往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β),再与HRP 标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色 。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关 。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度 。

        小鼠白介素-1β酶联免疫试剂盒加强各个环节的质量保证 ,充分发挥其方法学的优点 ,确保ELISA试验结果 。而本法不仅可以用来测定抗体,也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法 。
        小鼠白介素-1β酶联免疫试剂盒在实验过程中,能更有效的保持试剂稳定 ,并且容易保存 ,其操作方法简单,结果判定比同类产品更客观更具优势 。
        关于样本处理那些事 :
        (1)血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 ,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
        (2)血浆:小鼠白介素-1β酶联免疫试剂盒应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂 ,混合10-20分钟后 ,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成 ,应该再次离心 。
        (3)尿液:用无菌管收集 ,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 ,保存过程中如有沉淀形成 ,应再次离心 。胸腹水、脑脊液参照实行 。
        (4)细胞培养上清 :检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液 ,细胞浓度达到100万/ml左右。人组胺检测试剂盒品牌通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
        (5)组织标本 :切割标本后,称取重量 。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分 。离心20分钟左右(2000-3000转/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测 ,其余冷冻备用。
        (6)标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验 。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存 ,但应避免反复冻融.
        (7)不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性 。

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