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        兔病毒通用型(RHDV)PCR检测试剂盒使用方法 :
        点击次数:678 更新时间:2024-08-30

        使用方法:

        测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂  ,很少量的酶即可诱导大量的催化反应 ,产生可供观察的显色反应现象 。因此该体系常被称为酶放大体系。

        1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支 ,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

         12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

         6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

         3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

         1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

        2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl ,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

        3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

        4. 配液 :将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

        5. 洗涤:小心揭掉封板膜 ,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液 ,静置30秒后弃去 ,如此重复5次,拍干。

        6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外 。

        7. 温育 :操作同3 。

        8. 洗涤 :操作同5。

        9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

        10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

        11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

         

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