使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶 。酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系 。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔 、待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50μl ，待测样品孔中先加样品稀释液40μl ，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍） 。加样将样品加于酶标板孔底部 ，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀 。|
3. 温育 ：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤 ：小心揭掉封板膜，弃去液体 ，甩干 ，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育 ：操作同3 。
8. 洗涤：操作同5 。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。
11. 测定 ：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值） 。 测定应在加终止液后15分钟以内进行 。