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操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样
：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一
、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔
、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉
，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七

、第八孔中加到第五、第六孔中
，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀
；混匀后从第五

、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中
，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉
。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L
，120 ng/L ，60 ng/L
，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）
。加样将样品加于酶标板孔底部
，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀
。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液

：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体
，甩干
，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次
，拍干。

6. 加酶
：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育
：操作同3
。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl
，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）
。

11. 测定
：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟
。

硫化亚铁;硫化铁Iron sulfide1317-37-9

氯化高铁(阴凉);氯化铁;三氯化铁;氯化高铁Iron(III) chloride solution;Iron (III) chloride hydrated;Iron(III) chloride;Ferric salts10025-77-1

依思明蓝IsaMin blue;Brilliant sky blue 5G;C.I. 427001324-86-3

靛红Isatin91-56-5

乙酸异戊酯;醋酸戊酯;醋酸异戊酯;香蕉水;香蕉油;异戊酯IsoaMyl acetate;γ-Methylbutyl ethanoate;Banana oil;AMyl acetate;Pear oil;3-Methyl-1-butanol acetate123-92-2

异戊醇;3-甲基-1-丁醇;异丁原醇IsoaMyl alcohol;Isobutylcarbinol;Isopentyl alcohol;IsoaMyl alcohol priMary123-51-3

异戊胺;异丁基甲胺;3-甲基丁胺;1-氨基-3-甲基丁烷IsoaMylaMine;3-MethylbutylaMine;1-AMino-3-Methylbutane;3-Methyl-1-butanaMine,IsopentylaMine107-85-7

乙酸异丁酯Isobutyl acetate110-19-0

氯甲酸异丁酯;氯蚁酸异丁酯;氯碳酸异丁酯Isobutyl chloroforMate543-27-1

甲酸异丁酯;蚁酸异丁酯Isobutyl forMate542-55-2

异丁胺;1-氨基异丁烷;2-甲基丙胺IsobutylaMine;1-AMinoisobutane;2-Methyl propylaMine78-81-9

异丁酸;2-甲基丙酸;二甲基乙酸;异丙基甲酸Isobutyric acid;IsopropylforMic acid;DiMethylacetic acid79-31-2cyclohexene-1-one;Isoacetophorone78-59-1

乙酸异丙酯;醋酸异丙酯Isopropyl acetate108-21-4

肉豆蔻酸异丙酯;十四酸异丙酯;十四酸1-甲基乙基酯Isopropyl Myristate;Isopropyl tetradecanoate110-27-0

4-氯间甲酚4-Chloro-3-methylphenol59-50-7

异丙基环己烷;六氢异丙苯;六氢枯烯;2-环己基丙烷Isopropylcyclohexane;HexahydrocuMene;2-Cyclohexylpropane696-29-7

异喹啉 97％Isoquinoline119-65-3

异戊醛;3-甲基丁醛;异缬草醛Isovaleraldehyde;3-Methylbutyraldehyde;Isovaleric aldehyde;3-Methyl butanal590-86-3

衣康酸;亚甲基琥珀酸;2-亚甲基丁二酸;分解乌头酸Itaconic acid;Propylenedicarboxylic acid97-65-4

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