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        人骨成型蛋白7(BMP-7)检测ELISA试剂盒使用方法
        点击次数:612 更新时间:2022-10-12

        使用方法:


        1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。


        5号标准品              150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液


        4号标准品              150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液


        3号标准品             150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液


        2号标准品             150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液


        1号标准品             150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


        2. 加样 :分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂 ,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl ,待测样品孔中先加样品稀释液40μl ,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于         酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


        3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  


        4. 配液 :将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用


        5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体 ,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去 ,如此重复5次 ,拍干。


        6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl ,空白孔除外。


        7. 温育 :用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  


        8. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次 ,拍干。


        9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.


        10. 终止:每孔加终止液50μl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


        11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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