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        讲述Wnt-3a蛋白Elisa试剂盒实验中基质效应
        点击次数:457 更新时间:2022-03-28
          242net必赢在Wnt-3a蛋白Elisa试剂盒实验中 ,有时会遇到样品浓度挨近试剂盒的灵敏度就容易发生样本OD450值低于空白值的现象,特别是在血清和血浆样本中。这就有可能是基质效应导致的结果。
          首先242net必赢要知道什么是基质,基质是指样品中目标分析物以外的部分。由于基质成分会对分析过程有显著干扰 ,影响分析结果的准确性 。业内把这些影响统称为基质效应。这是Wnt-3a蛋白Elisa试剂盒开发和使用中需要避开的雷 。
          如何判断是否是基质效应呢?
          当单个样本或少量样本值低于空白值时 ,可能是实验操作出现问题,这时应增加重复,进步操作技术。当许多样本都低于空白值时,应思考基质效应的影响 ,建立校正曲线予以修改。基质效应的原因错综复杂,有可能是样品中存在的基质导致原抗体的联络结合能力下降,便产生了样本值低于空白值的现象 。导致样本值无法计算出数值,或许数值为负 。
          虽然原因复杂,但有方法可以用来评估基质效应。
          第一种方法是采用线性稀释,一般来讲,抗原和捕获抗体 、检测抗体之间的结合作用很强,样品浓度被稀释并不影响它们的结合,而造成基质效应的非特异结合的力要弱很多 ,如果不断稀释样品 ,非特异结合造成的干扰会逐步减少 ,测量值也更接近真实值 。没有基质效应时,无论如何稀释,测量值都和真实值吻合。而有基质效应时,稀释会造成非特异性结合比例的减少 ,测量值也相应地产生很大改变。
          第二种方法是掺入回收率实验,将低、中和高浓度的分析物掺入到已测定过浓度的样本中,掺入前后实测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈现 。回收率介于80-120%,才符合标准 。
          那242net必赢如何避免ELISA实验中基质效应?
          基质效应可以通过产品阶段的优化尽可能去消除的。我司针对ELISA产品进行了多种优化 。Wnt-3a蛋白Elisa试剂盒在开发进程中 ,标准品不选用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液,只能选用其仿照物。242net必赢量身定制的缓冲液系统,这些优化后的缓冲液体系能很好消除基质效应。还有当检测某个分析物时,其他相关因子或类似结构因子如果有非特异性结合,也会导致基质效应,242net必赢也因此做了大量的交叉反应,确保没有明显的交叉反应和干扰 。而且242net必赢试剂盒必须通过严格的基质效应测试,全部包括线性稀释和掺入回收率实验 ,并把测试结果记录在说明书中。
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